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細胞因子試劑盒在科研方面的應用
2022-02-20 瀏覽次數：1403
細胞因子試劑盒從靈敏度、特異性、精密度、穩定性、簡便性、安全性及經濟性全面評價。靈敏度有二層含義，為試劑檢出被檢物質的低量的能力；為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。特異性常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結構部份的物質可能存在交叉反應，使測定結果升高，可能導致假陽性，所以交叉反應是評價其質量的關鍵指標。精密度一般指其批內CV%，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍。準確度：通過添加回收實驗進行評價。
細胞因子試劑盒主要用于科研方面，不用于臨床診斷，可以用于檢測各種指標。做快速檢測時，待檢測的樣品數越多，出現加錯的概率也就越大，特別容易出錯的是在酶聯偶合物（conjugate）與樣品液或標液混合的階段，因為這時使用的是單道槍。其實解決的方法比較簡單，我們只要把操作上的順序加以調換，即先把待測液或標液加入稀釋孔中，再加入酶聯偶合物就不會出現錯誤了。而且這兩個順序交還對結果也沒有影響，因為這一步的主要目的是讓兩種液體充分混合。
細胞因子試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法，用抗肝細胞生長因子(HGF)抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的人肝細胞生長因子(HGF)與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗肝細胞生長因子(HGF)抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗肝細胞生長因子(HGF)抗體與結合在包被抗體上的人肝細胞生長因子(HGF)結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，肝細胞生長因子(HGF)濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中細胞生長因子(HGF)的濃度。
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